腸激酶（Enterokinase, EK）是一種高度專(zhuān)一性識別 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在Lys的C 端水解多肽。具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)?？稍谳^寬的pH范圍(4.5~9.5)和較寬溫度范圍內有效切割融合蛋白。通常用于融合蛋白 N-末端標簽的去除。冀百康重組腸激酶采用重組畢赤酵母高效分泌表達技術(shù)，經(jīng)層析純化、 超濾、酶液配制而制成的重組腸激酶液體。本品氨基酸序列來(lái)源于牛腸激酶序列，含有6個(gè)組氨酸標簽（含6x His-tag），可使用親和層析除去樣品中殘留的重組腸激酶。

應用

• 用于融合蛋白的酶切，生物藥物生產(chǎn)

優(yōu)勢

• 無(wú)動(dòng)物源性：無(wú)動(dòng)物病毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染，安全性高。

• 高純度：經(jīng)層析純化，SDS-PAGE 檢測為一單主條帶，純度達 95%以上。

• 高特異性：不含其它蛋白酶活性，無(wú)非特異性酶切。

• 高耐受性：在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。
  

• 1000L級別以上生產(chǎn)規模，產(chǎn)品批次之間質(zhì)量穩定。

• 合規性：生產(chǎn)設備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規要求，符合GMP指導原則。

• 質(zhì)量文件完整：按客戶(hù)需求，可提供相關(guān)法規支持文件。

產(chǎn)品中文名同義詞：腸蛋白酶、腸胨酶、腸激活酶、腸肽酶

本品僅供研究使用，不得用于動(dòng)物或人類(lèi)的診斷或治療。

運輸及儲存穩定性

• 運輸穩定性：冰袋運輸，活性穩定。

• 儲存穩定性：于遮光、密封、-15℃及以下環(huán)境，可穩定存放 24 個(gè)月。在 36 個(gè)月時(shí)仍可保留 95%以上活 性。在 2~8℃存放，7 天內酶活保持穩定。

• 凍融穩定性：模擬-15℃冰箱存放和室溫使用進(jìn)行凍融測試，凍融 20 次內酶活保持穩定。

推薦使用方法

• 25℃酶切條件為：25mM Tris-HCl pH8.0 體系中融合蛋白 0.1-1mg/ml（蛋白總量 50-100μg），重組EK0.1~2U，酶切16~24小時(shí)，用SDS-PAGE檢測酶切效果。

• 4℃酶切條件為：可在 4℃對底物進(jìn)行有效低溫酶切，但需要將酶切時(shí)間延長(cháng)至 48~64 小時(shí)，或增加2-3倍酶量。低溫酶切有時(shí)候可獲得比25℃更好的酶切效果。

• 在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果會(huì )受影響?？蓞⒄找韵峦扑]方法進(jìn)行酶切：

• 1） 為獲得理想酶切結果，請將樣品透析到25mM Tris-HCl pH 8.0 緩沖液中，再進(jìn)行酶切；

• 2） 若不便透析，可將樣品稀釋?zhuān)溥蚝吭?00mM 以下，NaCl 濃度在50mM以下，甘油濃度 5% 以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即1U酶切500μg蛋白）；

• 3） 如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種，且不便去除，此時(shí)適當增加酶量或延長(cháng)酶切時(shí)間，也可達到較好酶切效果。

• 可對酶切條件進(jìn)行優(yōu)化，例如緩沖液pH，融合蛋白濃度，EK的量，以及酶切時(shí)間，融合蛋白能在穩定條件下被酶切，用SDS-PAGE檢測酶切效果。由于融合蛋白性質(zhì)與溶液體系不同會(huì )導致酶切效果不同，建 議客戶(hù)進(jìn)行預實(shí)驗，以達到最佳酶切效果。

• 去除重組腸激酶的辦法：可使用胰蛋白酶抑制劑親和層析去除重組腸激酶。

注意：不建議 37℃條件下酶切，可能會(huì )有非特異性酶切出現。

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